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TEM生物样品 组织的取材固定及注意事项

更新时间:2021-12-14 点击数:8484

(1)定位准确:取材部位解剖水平的准确定位要求误差≤1mm。对照组与实验组的取材组织区位、方向,应严格一致并有代表性。

2操作迅速:离开活体后的组织应快捷地(<2mim)浸入固定液(事先备好醛类固定液置2ml圆底离心管,常温)。注意:具有灌注固定操作经验者,最好在取材前做好灌注固定,否则就直接快捷地取材,以免灌注不当的损伤。

3样品尺寸:组织块粒径大小首先要与固定液渗透率(≤0.5mm)相适应,

样品块过大,内部固定不良。但样品过小,观察内容受限。可参照模式图取材。注意:将较大的组织块修切成符合要求的TEM标本时,须事先备好蜡盘,滴上固定液,快速将样品浸在液滴中修切,确认修切的样品条均包含目标结构,其最小宽度≤1mm,用牙签挑出3-4条,置入2ml离心管醛类固定液(室温)中,即刻密闭。

4)操作轻柔、清洁:取材操作动作始终保持轻柔,尽可能避免金属器具对组织的夹持、挤压或牵拉,所用器具必须清洁,使用缓冲液清洗。

5使用合适的温度:灌注固定液、缓冲液,均采用室温;刚解剖切取的组织块浸入醛类固定液后,先采用常温,15-30min后,置4℃低温保存。

 

 

TEM生物医学样品 组织块的形状与尺寸 示意图


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