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公众号:生物医学电镜
实验室:山东省济南市槐荫区段兴西路四号 4号楼103室
单位:山东微亚生物科技有限公司
邮编:250022
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在生物SEM用于观察研究组织的自然表面或断裂表面的立体超微结构。这种方法常与TEM观察组织超薄切片相辅佐。
组织SEM取材方法与TEM类似,但与TEM最大不同是:保护好组织的被观察表面,及对这个面的识别和无损伤清洁。
在具体操作中,应做到以下五点:
❶必须定位准确,并要保证对照组与实验组保持取材位点、方向一致;
❷确认并保护好被观察面的精细结构,做好标记;
❸修切样品块,标准样品块尺寸约3~5立方毫米,块太大会影响固定、脱
水、干燥及镀膜效果;修切操作应避免金属器材牵拉、按压等物理损伤;
❹用缓冲液冲洗被观察表面的杂质、污物等,2~3遍,充分暴露表面精细
结构;对肠粘膜、呼吸道粘膜等上皮细胞表面附着的粘液黏附物的祛除,要根据研究目的选择合适的物理或化学清洁方法,请参考“微亚专业咨询”;
❺取材操作迅速,离体后尽快浸入固定液,减少组织细胞自容。对于实验动物,做灌注固定再取材更好。
完成取材和初固定之后,尽快送实验室进入制备程序。
(外地课题组寄送样品,请注意参考:5.寄送电镜样品注意事项)
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